将新鲜或冷冻猪胰绞碎,加入3倍量O℃以下的丙酮,搅拌th,离心,分离沉淀。湿饼再续加3倍量的冷丙酮,重复以上操作,然后将湿饼在真空干燥箱中干燥,粉碎,得丙酮干粉。将丙酮干粉中加入20倍的水,室温下搅拌提取2h,提取液过滤时加入少量滑石粉以助滤,过滤后得澄清提取液。将该提取液用水稀释至2~3倍,加入已用0. Imol/L、pH6.4磷酸盐缓冲溶液平衡Amberlite CG-50树脂(原料:树脂一1:2),搅拌吸附2h,或用pH4.5醋酸盐缓冲液平衡的445大孔树脂(提取液:树脂-30:1),搅拌吸附th。再用蒸馏水将树脂漂洗干净。然后向树脂中加入0. 5mol/L、pH9.3氯化铵缓冲液(树脂:缓冲液一1:1.5)搅拌洗脱th,分出树脂。洗脱液以2mol/L醋酸调pH至中性,过滤,得澄清洗脱液。445大孔树脂上的酶可被pH4.8氯化铵溶液洗脱,也可仿用Amberlite CG-50树脂的洗脱条件。洗脱液在5℃下,边搅拌边加入3倍量的-5℃的丙酮;继续搅拌10 min,再于-5℃静放沉淀数小时。过滤,收集沉淀,用丙酮、乙醚各洗2~3次,真空干燥,可得弹性蛋白酶。
中文名 | 胰弹性酶 |
英文名 | elastase from human leukocytes |
别名 | 弹性酶 胰肽酶E 胰弹性酶 弹力纤维酶 弹性纤维酶 中性粒细胞弹性蛋白酶 弹性蛋白酶 来源于人类白血球 ELASTASE 来源于人类白血球 |
英文别名 | ELASTASE Elastase EC 3.4.21.36 EC 3.4.21.37 LYSOSOMAL ELASTASE neutrophil elastase ELASTASE, LEUKOCYTE PANCREATOPEPTIDASE E pancreatopeptidase E macrophage metalloelastase Elastase, Human Neutrophil elastase from human leukocytes |
CAS | 9004-06-2 |
EINECS | 232-670-7 |
存储条件 | -20°C |
外观 | 冻干粉 |
物化性质 | 弹性蛋白酶为白色或淡灰色结晶性粉末。能溶于水,在ph4~10.5及20C时稳定,60C下可保存3~12个月.复方弹性软膏酶为含弹性酶和硫酸新霉的白色软膏. |
WGK Germany | 3 |
FLUKA BRAND F CODES | 3-10 |
上游原料 | 吸附树脂 分离树脂 |
将新鲜或冷冻猪胰绞碎,加入3倍量O℃以下的丙酮,搅拌th,离心,分离沉淀。湿饼再续加3倍量的冷丙酮,重复以上操作,然后将湿饼在真空干燥箱中干燥,粉碎,得丙酮干粉。将丙酮干粉中加入20倍的水,室温下搅拌提取2h,提取液过滤时加入少量滑石粉以助滤,过滤后得澄清提取液。将该提取液用水稀释至2~3倍,加入已用0. Imol/L、pH6.4磷酸盐缓冲溶液平衡Amberlite CG-50树脂(原料:树脂一1:2),搅拌吸附2h,或用pH4.5醋酸盐缓冲液平衡的445大孔树脂(提取液:树脂-30:1),搅拌吸附th。再用蒸馏水将树脂漂洗干净。然后向树脂中加入0. 5mol/L、pH9.3氯化铵缓冲液(树脂:缓冲液一1:1.5)搅拌洗脱th,分出树脂。洗脱液以2mol/L醋酸调pH至中性,过滤,得澄清洗脱液。445大孔树脂上的酶可被pH4.8氯化铵溶液洗脱,也可仿用Amberlite CG-50树脂的洗脱条件。洗脱液在5℃下,边搅拌边加入3倍量的-5℃的丙酮;继续搅拌10 min,再于-5℃静放沉淀数小时。过滤,收集沉淀,用丙酮、乙醚各洗2~3次,真空干燥,可得弹性蛋白酶。
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