透明糖酶
质酸酶(Hyaluronidase)
CAS: 9001-54-1;37326-33-3
化学式: C18H14O7
性质
本品系从哺乳动物睾丸中提取的一种能水解玻璃酸黏多糖的酶；为一种碱性蛋白，属于切糖苷酶，能催化玻璃酸和结缔组织的某些其他酸性黏多糖如骨素A和C的己糖糖苷键的水解，产物主要为
四糖和六糖等偶数寡糖。白色或微黄色粉末；无臭。在水中易溶，在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。稳定性较好。42℃加热60 min活力不损失，100℃加热5min活力可保留80%。在低浓度水溶液中较易失活，可用阿拉伯胶或明胶保护。FeZ+、Cu2+离子对酶有可逆抑制作用。Pbz+、Hgz+、NjZ+等离子对酶活性没有明显影响。硫酸软骨素B(皮肤素)、硫酸类肝素、硫酸角质素、肝素及高浓度玻璃酸对酶均有抑制作用，但可被0. 15mol．L-l氯化钠或硫酸鱼精蛋白所逆转。本品可水解组织基质的主要成分为透明质酸，从而降低组织黏液，提高毛细血管和组织的通透性，加速细胞内外物质的扩散。临床有利于加速皮下、肌肉注射药液的吸收等，并有利于受精时精子进入卵子。
制法
- 牛、羊睾丸提取法。将冷冻的羊和牛睾丸用刀切开，剥除内外皮层及副睾丸，绞碎成糜浆。称取糜浆lOokg倒入预先配好的冷醋酸液（水90kg，冰醋酸600mL，1mol／L盐酸10L混合而成）中，在-5℃下激烈搅拌3～4min，以后每隔5min搅拌一次，提取4h。然后过滤，得提取液125～140L。再将浆渣进行第二次提取，提取酸液用量为第一次用量的1/3，合并提取液。在不断搅拌下，每升提取液加硫酸铵210g，完全溶解后，静置th左右，用涤纶布吊滤过夜，得滤液110L。然后再按每升滤液加入硫酸铵290g，使完全溶解，静置th，吊滤过夜，得玻璃酸酶粗品。将粗品溶于5L冷蒸馏水中，搅拌下加入硫酸铵12 5g，使完全溶解，在10℃放置过夜。除去液面脂肪，虹吸出上层清液，并过滤。滤液在不断搅拌下，缓缓加入硫酸铵750g，使完全溶解，在10℃左右放置过夜。次日吸去上层清液，得盐析物。将盐析物溶入500mL冷的蒸馏水中，装入透析袋，置于25L、pH6.5磷酸盐一柠檬酸缓冲溶液（柠檬酸7. 5g，Na2 HP04．12H20 60g，氯化钠70g，用水配成2500mL，用柠檬酸调整pH为6.5）中，于约10℃透析24h后过滤，得透析液。透析液于冰浴中冷却，加入15%Na2 HP04·l2H2 0溶液50mL，在不断搅拌下，缓缓加入20%-水乙酸钙溶液30mL，并以0.5mol／L氢氧化钠溶液调pH至8.5，继续搅拌lOmin，减压过滤，滤液以0. 5mol／L盐酸调pH7.O，冷冻干燥，得无热原玻璃酸酶精品。收率为每公斤睾丸得2×104单位以上。
- 微生物发酵法。
用途
- 蛋白分解酶。可加速皮下、肌内注射药液的吸收，促进局麻药的浸润，减轻注射部位疼痛，促进手术及创伤后局部水肿或血肿的消散。也可用于肠粘连。
- 用法及剂量：皮下或肌肉注射，150～15 00单位／次，1次／1～2日，先用生理盐水或注射用水溶解，再与其他注射剂混合使用；皮下输液，lOOOmL大输液中加本品150单位。
- 制剂 注射用玻璃酸酶。
安全性
- 小鼠皮下注射LD50>25万单位/kg；小鼠，肌内注射LD50 >1. 25万单位/kg。禁用于感染部位，以防引起扩散；不能静注；现配现用。有时可出现过敏反应，用前先作皮试。水杨酸类能抑制本品的作用。
- 密闭，在阴凉干燥处保存。
| 中文名 | 质酸酶 |
| 英文名 | Hyaluronidase |
| 别名 | 质酸酶 羊睾丸 透明糖酶 玻璃酸酶 透明质酸酶 透明质酸酶I-S 透明质酸酶IV-S 透明质酸酶(羊睾丸) |
| 英文别名 | Hydase Neopermease Hyaluronidase Chondroitinase Hyaluronoglucosidase Hyaluronidase,bovine testis Hyaluronidase ex Bovine Testes HYALURONATE 4-GLYCANOHYDROLASE HYALURONATE 4-GLYCANOHYDROLASE TYPE V HYALURONATE 4-GLYCANOHYDROLASE TYPE II HYALURONATE 4-GLYCANOHYDROLASE TYPE I-S HYALURONATE 4-GLYCANOHYDROLASE TYPE III HYALURONATE 4-GLYCANOHYDROLASE TYPE IV-S HYALURONATE 4-GLYCANOHYDROLASE TYPE VIII Hyaluronidase Streptomyces hyalurolyticus hyaluronidase from streptomyces hyaluro-lyticus |
| CAS | 9001-54-1 37326-33-3 |
| EINECS | 232-614-1;253-464-3 |
| 化学式 | C18H14O7 |
| 分子量 | 342.29956 |
| 存储条件 | −20°C |
| 外观 | 冻干粉 |
| 颜色 | white to slightly brown |
| Merck | 13,4777 |
| 物化性质 | 白色或浅黄色絮状冻干物，无臭，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮和乙醚，最适pH值4.5-6.0。稳定性：冻干物于4℃保存一年活力无明显下降；42℃条件下，加热60min活力不变；100℃加热5min保留80%活力；低浓度水溶液易失活，加入NaCl可增加其稳定性；遇热易变质。抑制剂有重金属离子(Cu2+、 HR<2+、Fe<3+、Mn<2+、Zn<2+)、酸性有机染料、胆盐、多聚阴离子和高分子量的多聚糖如硫酸软骨素B、肝素、硫酸乙酰肝素；激活剂为多聚阳离子。1%水溶液在280nm处吸收系数为8。透明质酸酶主要是水解透明质酸中的N-乙酰-β-D-葡糖胺和D-葡糖醛酸之间的β-1，4-键，产生四糖残基，不释放单糖，酶反应：透明质酸+H2O═寡聚糖。 |
| 产品用途 | 用于生化研究，临床上常用于促进手术及创伤后局部水肿或血肿的消散，促进局麻药的浸润，减轻注射部位的疼痛，加速皮下、肌肉注射药液的吸收，也可用于肠粘连。 |
| 安全术语 | S22 - 切勿吸入粉尘。 S24/25 - 避免与皮肤和眼睛接触。 |
| WGK Germany | 3 |
| FLUKA BRAND F CODES | 3-10 |
| 海关编号 | 35079090 |
| 上游原料 | 胶管 |
| 参考资料 展开查看 | 1. 陈巧玲 袁琳 王也 等. 北苍术粗多糖提取工艺优化及体外抗炎活性研究[J]. 生物医学工程与临床 2019(5):517-523. 2. 刘畅, 陈宇欣, 王江帆,等. 基于枝化多肽的多功能药物递送系统用于肿瘤细胞核的精准靶向治疗[J]. 高分子学报, 2018, 000(006):682-691. 3. 张浩, 何林燕, 王艳,等. 库拉索芦荟凝胶的晒后修复功效研究[J]. 香料香精化妆品, 2019, No.174(03):65-71. 4. 钱正月, 李俊, 黄成,等. 栀子柏皮汤不同配伍对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的治疗作用[J]. 安徽医科大学学报, 2016, 51(001):68-72. 5. 张贝贝, 王颖, 张冀,等. 犬卵透明带3蛋白原核表达和抗血清的制备[J]. 四川动物, 2016, 35(005):697-702. 6. 樊梓鸾, 赵梓煣, 赵翔,等. 红豆越橘总三萜的纯化及体外抗炎活性[J]. 南京林业大学学报:自然科学版, 2019, 043(004):132-138. 7. 管凌君, 陈小军, 沈殿晶,等. 防治光肩星天牛膏剂的制备及保湿性能研究[J]. 林业与环境科学, 2020, 036(002):P.26-32. 8. 司星辉. 刺激响应性高分子材料用于蛋白药物递送控释的研究[D].中国科学技术大学,2020. 9. 赵月. 仿生智能高分子水凝胶材料的设计制备及其生物应用[D].吉林大学,2020. 10. Ma, Xuebin, et al. "In situ photocrosslinked hyaluronic acid and poly (γ-glutamic acid) hydrogels as injectable drug carriers for load-bearing tissue application." Journal of Biomaterials Science, Polymer Edition 29.18 (2018): 2252-2266.https://doi.org/10. 11. [IF=3.517] Xuebin Ma et al."In situ photocrosslinked hyaluronic acid and poly (γ-glutamic acid) hydrogels as injectable drug carriers for load-bearing tissue application."J Biomat Sci-Polym E. 2018;29(18):2252-2266 12. [IF=11.622] Zheng Chunli et al."Systems pharmacology: a combination strategy for improving efficacy of PD-1/PD-L1 blockade."Brief Bioinform. 2021 Sep;22(5): 13. [IF=10.317] Xuemin Liu et al."Molecular recognition-directed site-specific release of stem cell differentiation inducers for enhanced joint repair."Biomaterials. 2020 Feb;232:119644 14. [IF=8.947] Shikun Wei et al."A composite hydrogel with co-delivery of antimicrobial peptides and platelet-rich plasma to enhance healing of infected wounds in diabetes."Acta Biomater. 2021 Apr;124:205 15. [IF=6.529] Yue Xiao et al."Predicting the herbal medicine triggering innate anti-tumor immunity from a system pharmacology perspective."Biomed Pharmacother. 2021 Nov;143:112105 16. [IF=6.205] Haixia Sun et al."Design and Discovery of Natural Cyclopeptide Skeleton Based Programmed Death Ligand 1 Inhibitor as Immune Modulator for Cancer Therapy."J Med Chem. 2020;63(19):11286–11301 17. [IF=5.722] Zhu Jinglin et al."Licorice extract inhibits growth of non-small cell lung cancer by down-regulating CDK4-Cyclin D1 complex and increasing CD8+ T cell infiltration."Cancer Cell Int. 2021 Dec;21(1):1-18 18. [IF=3.644] Wang Xinlu et al."Preparation of Antimicrobial Hyaluronic Acid/Quaternized Chitosan Hydrogels for the Promotion of Seawater-Immersion Wound Healing."Front Bioeng Biotech. 2019 Dec;0:360 19. [IF=3.361] Yu Xue et al."Synthesis of hyaluronic acid hydrogels by crosslinking the mixture of high-molecular-weight hyaluronic acid and low-molecular-weight hyaluronic acid with 1,4-butanediol diglycidyl ether."Rsc Adv. 2020 Feb;10(12):7206-7213 20. [IF=2.967] Zihang Chen et al."Sarcoma‑180 tumor affects the quality of oocytes in mice."Oncol Lett. 2021 Mar;21(3):1-1 21. [IF=5.81] Xing Feng et al."Docetaxel-Loaded Novel Nano-Platform for Synergistic Therapy of Non-Small Cell Lung Cancer.."Front Pharmacol. 2022 Mar;13:832725-832725 22. [IF=5.268] Mi Wang et al."Synergistic H2O2 Self-supplying and NIR-Responsive Drug Delivery Nanoplatform for Chemodynamic-Photothermal-Chemotherapy."Colloid Surface B. 2022 Feb;:112412 23. [IF=7.711] Mei Zhao et al."Viscosity-Based Flow Sensor on Paper for Quantitative and Label-Free Detection of α-Amylase and Its Inhibitor."Acs Sensors. 2022;XXXX(XXX):XXX-XXX 24. [IF=11.556] Dong Peng et al."Extracellular vesicles derived from astrocyte-treated with haFGF14-154 attenuate Alzheimer phenotype in AD mice."Theranostics. 2022; 12(8): 3862–3881 |
透明糖酶 - 性质
可信数据
本品系从哺乳动物睾丸中提取的一种能水解玻璃酸黏多糖的酶；为一种碱性蛋白，属于切糖苷酶，能催化玻璃酸和结缔组织的某些其他酸性黏多糖如骨素A和C的己糖糖苷键的水解，产物主要为
四糖和六糖等偶数寡糖。白色或微黄色粉末；无臭。在水中易溶，在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。稳定性较好。42℃加热60 min活力不损失，100℃加热5min活力可保留80%。在低浓度水溶液中较易失活，可用阿拉伯胶或明胶保护。FeZ+、Cu2+离子对酶有可逆抑制作用。Pbz+、Hgz+、NjZ+等离子对酶活性没有明显影响。硫酸软骨素B(皮肤素)、硫酸类肝素、硫酸角质素、肝素及高浓度玻璃酸对酶均有抑制作用，但可被0. 15mol．L-l氯化钠或硫酸鱼精蛋白所逆转。本品可水解组织基质的主要成分为透明质酸，从而降低组织黏液，提高毛细血管和组织的通透性，加速细胞内外物质的扩散。临床有利于加速皮下、肌肉注射药液的吸收等，并有利于受精时精子进入卵子。
最后更新：2024-01-02 23:10:35
透明糖酶 - 制法
可信数据
- 牛、羊睾丸提取法。将冷冻的羊和牛睾丸用刀切开，剥除内外皮层及副睾丸，绞碎成糜浆。称取糜浆lOokg倒入预先配好的冷醋酸液（水90kg，冰醋酸600mL，1mol／L盐酸10L混合而成）中，在-5℃下激烈搅拌3～4min，以后每隔5min搅拌一次，提取4h。然后过滤，得提取液125～140L。再将浆渣进行第二次提取，提取酸液用量为第一次用量的1/3，合并提取液。在不断搅拌下，每升提取液加硫酸铵210g，完全溶解后，静置th左右，用涤纶布吊滤过夜，得滤液110L。然后再按每升滤液加入硫酸铵290g，使完全溶解，静置th，吊滤过夜，得玻璃酸酶粗品。将粗品溶于5L冷蒸馏水中，搅拌下加入硫酸铵12 5g，使完全溶解，在10℃放置过夜。除去液面脂肪，虹吸出上层清液，并过滤。滤液在不断搅拌下，缓缓加入硫酸铵750g，使完全溶解，在10℃左右放置过夜。次日吸去上层清液，得盐析物。将盐析物溶入500mL冷的蒸馏水中，装入透析袋，置于25L、pH6.5磷酸盐一柠檬酸缓冲溶液（柠檬酸7. 5g，Na2 HP04．12H20 60g，氯化钠70g，用水配成2500mL，用柠檬酸调整pH为6.5）中，于约10℃透析24h后过滤，得透析液。透析液于冰浴中冷却，加入15%Na2 HP04·l2H2 0溶液50mL，在不断搅拌下，缓缓加入20%-水乙酸钙溶液30mL，并以0.5mol／L氢氧化钠溶液调pH至8.5，继续搅拌lOmin，减压过滤，滤液以0. 5mol／L盐酸调pH7.O，冷冻干燥，得无热原玻璃酸酶精品。收率为每公斤睾丸得2×104单位以上。
- 微生物发酵法。
最后更新：2022-01-01 11:11:14
透明糖酶 - 标准
可信数据
本品系自哺乳动物睾丸中提取的一种能水解玻璃酸类黏多糖的酶。每lmg中玻璃酸酶的活力不得少于300单位。
最后更新：2024-01-02 23:10:35
透明糖酶 - 性状
可信数据
- 本品为白色至微黄色粉末；无臭。
- 本品在水中易溶，在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。
最后更新：2022-01-01 13:38:24
透明糖酶 - 用途
可信数据
- 蛋白分解酶。可加速皮下、肌内注射药液的吸收，促进局麻药的浸润，减轻注射部位疼痛，促进手术及创伤后局部水肿或血肿的消散。也可用于肠粘连。
- 用法及剂量：皮下或肌肉注射，150～15 00单位／次，1次／1～2日，先用生理盐水或注射用水溶解，再与其他注射剂混合使用；皮下输液，lOOOmL大输液中加本品150单位。
- 制剂 注射用玻璃酸酶。
最后更新：2022-01-01 11:11:15
透明糖酶 - 鉴别
可信数据
- 取本品，加磷酸盐缓冲液(通则1207)溶解并稀释制成每lml中含500〜1000单位的溶液；取试管2支,各加上述溶液lml ,取其中1支加热煮沸，放冷，然后2支内各加玻璃酸钾贮备液(通则1207)lml,摇匀，置37°C水浴中保温30分钟，取出，各加血清溶液（通则1207)lml,摇匀，未加热煮沸的试管内的溶液应较清。
- 取健康豚鼠1只，分别于背部两处，皮内注射0.25%亚甲蓝的氯化钠注射液0.lml ,作为对照，另两处皮内注射用上述溶液制成的每lml中含本品10单位的溶液0.lml,四处注射位置须交叉排列，相互间的距离应大于3cm,注射后5分钟，处死动物，将皮剥下，自反面观察亚甲蓝的扩散现象,供试品溶液所致的蓝色圈应大于对照所致的蓝色圈。
最后更新：2022-01-01 13:38:25
透明糖酶 - 安全性
可信数据
- 小鼠皮下注射LD50>25万单位/kg；小鼠，肌内注射LD50 >1. 25万单位/kg。禁用于感染部位，以防引起扩散；不能静注；现配现用。有时可出现过敏反应，用前先作皮试。水杨酸类能抑制本品的作用。
- 密闭，在阴凉干燥处保存。
最后更新：2022-01-01 11:11:15
透明糖酶 - 检查
可信数据
酸碱度
取本品适量，加水溶解并稀释制成每lml中含3mg的溶液，依法测定(通则0631)，pH值应为4.5〜7.5。
溶液的澄清度与颜色
取本品O.lg，加水10ml溶解后，依法检査（通则0901第一法与通则0902第一法），溶液应澄清无色；如显色，与黄色4号标准比色液比较，不得更深。
吸光度
取本品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每lml中含300单位的溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401)测定，在280nm波长处的吸光度不得大于0.6;在260nm的波长处的吸光度不得大于0.42。
酪氨酸
取甲、乙两支离心管，甲管中加供试品溶液（每lml中含玻璃酸酶5mg)lml,乙管中加水lml ,分别在105°C蒸发至干，各加6mol/L氢氧化钠溶液0.2ml，以121°C饱和蒸汽加热3小时或于水浴中加热4〜5小时，取出放冷，各加3.5mol/L硫酸溶液0.3ml,甲管中加水1.5ml,乙管中加酪氨酸对照品溶液（每lml中含酪氨酸对照品30ug的0.2mol/L硫酸溶液）1.5ml，然后各加含15%硫酸汞的2.5mol/L硫酸溶液1.5ml，置水浴中加热10分钟，放冷至室温，加3.5mol/L硫酸溶液lml与0.2%亚硝酸钠溶液lml ,摇匀，立即加水至6ml，计时，摇匀，离心。20分钟后，吸取上清液，照紫外-可见分光光度法（通则0401)，在540mn的波长处分别测定吸光度，按下式计算，每1单位含酪氨酸不得过0.1ug。
异常毒性
取体重17〜22g的健康小鼠5只，分别由皮下注射每lml中含玻璃酸酶10000单位的氯化钠注射液0.25ml,48小时内不得发生皮下组织坏死或死亡现象，如有一只小鼠发生组织坏死或死亡，应按上述方法复试，全部小鼠在48小时内不得有组织坏死或死亡现象。
细菌内毒素
取本品，依法检査(通则1143),每1单位玻璃酸酶中含内毒素的量应小于0.20EU。
最后更新：2022-01-01 13:38:26
透明糖酶 - 效价测定
可信数据
照玻璃酸酶测定法（通则1207)测定，即得。
最后更新：2022-01-01 13:38:26
透明糖酶 - 类别
可信数据
黏多糖分解酶。
最后更新：2022-01-01 13:38:26
透明糖酶 - 贮藏
可信数据
密闭，在阴凉干燥处保存。
最后更新：2022-01-01 13:38:27
透明糖酶 - 制法要求
可信数据
本品应从检疫合格的哺乳动物睾丸中提取，所用动物的种属应明确，生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。
最后更新：2022-01-01 13:38:27
透明糖酶 - 注射用玻璃酸酶
可信数据
本品为玻璃酸酶加适宜的赋形剂，经冷冻干燥的无菌制品。含玻璃酸酶的效价应为标示量的90.0%〜120.0% 。
性状
本品为白色或类白色的冻干块状物或粉末。
鉴别
照玻璃酸酶项下的鉴别试验，显相同的结果。
检查
- 酸碱度 取本品，每支加水2ml溶解后，依法测定（通则0631),pH值应为6.0〜7.5。
- 干燥失重 取本品约O.lg，置五氧化二磷干燥器中减压干燥4小时，减失重量不得过5.0%(通则0831)。
- 细菌内毒素 照玻璃酸酶项下的方法检查，应符合规定。
- 其他 应符合注射剂项下有关的各项规定（通则0102)。
效价测定
取本品5支，分别加适量冷的水解明胶稀释液(通则1207)溶解，并全量转移至同一100ml量瓶中，用上述稀释液稀释至刻度，摇匀。精密量取适量，用上述稀释液定量稀释制成每lml中约含1.5 单位的溶液，照玻璃酸酶测定法（通则1207)测定。
类别
同玻璃酸酶。
规格
（1)150单位（2)1500单位
贮藏
密闭，在阴凉干燥处保存。
最后更新：2022-01-01 13:38:28
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